Πώς να μετρήσετε την ανάπτυξη των βακτηρίων

Περιεχόμενο

• στάδια
• Μέθοδος 1 Παρατηρήστε τα βακτήρια απευθείας
• Μέθοδος 2 Μέτρηση της βιομάζας
• Μέθοδος 3 Προχωρήστε με στροβιλομετρία

Σε αυτό το άρθρο: Παρατήρηση των βακτηρίων απευθείαςΜελέξη βιομάζαςΠροδικασία με στροβιλομετρία8 Αναφορές

Υπάρχουν διάφοροι τρόποι μέτρησης της ανάπτυξης των βακτηριδίων, ενώ ορισμένοι είναι πιο δύσκολοι από τους άλλους να εφαρμόσουν. Τα πιο απλά χρησιμοποιούνται συνήθως και παρέχουν σχετικά ακριβή αποτελέσματα, υπό την προϋπόθεση ότι είναι αυστηρά κατά τη διάρκεια των μετρήσεων. Οι πιο συνηθισμένες τεχνικές είναι η παρατήρηση και καταμέτρηση των βακτηρίων, η μέτρηση της βιομάζας και της ξηρής βιομάζας και η θολερομετρία. Το σχολικό σας εργαστήριο θα πρέπει να διαθέτει τον απαραίτητο εξοπλισμό για τουλάχιστον μία από αυτές τις μεθόδους.

στάδια

Μέθοδος 1 Παρατηρήστε τα βακτήρια απευθείας

1. 
   

   
   Προετοιμάστε τον εξοπλισμό. Εκτός από αυτό που συνήθως βρίσκεται σε όλα τα εργαστήρια βιολογίας, θα χρειαστείτε κάποια συγκεκριμένα στοιχεία. Βεβαιωθείτε ότι έχετε όλα τα εργαλεία και τα δοχεία στα χέρια σας πρακτικά, ώστε να μην χρειάζεται να πηγαίνετε πέρα ​​δώθε στο ντουλάπι όπου αποθηκεύεται ο εξοπλισμός. Σκεφτείτε μπροστά από το τι θα κάνετε για να ξέρετε τι θα χρησιμοποιήσετε σε κάθε στάδιο. Θα πρέπει επίσης να γνωρίζετε ορισμένους βασικούς όρους.
   • Αποκτήστε ένα hemacytometer. Πρόκειται για μια λεπίδα με αριθμητικούς θαλάμους που συνδέεται με ένα μικροσκόπιο. Είναι ένα πολύ εύκολο εργαλείο για την προσαρμογή και τη χρήση. Μπορείτε να βρείτε κάποια από προμηθευτές που ειδικεύονται στον εξοπλισμό για σχολεία και ερευνητικά εργαστήρια. Συνήθως παρέχεται εγχειρίδιο χρήστη.
   • Πάρτε ένα πιάτο Petri. Πρόκειται για ένα μικρό, στρογγυλό, ρηχό δοχείο όπου μπορείτε να παρατηρήσετε βακτηρίδια.
   • Ο όρος "καλλιέργεια" αναφέρεται σε έναν μικροοργανισμό ο οποίος καλλιεργείται τεχνητά ως μέρος ενός επιστημονικού πειράματος.
   • Ο «ζωμός του πολιτισμού» είναι το μέσο στο οποίο θα αναπτυχθεί ο πολιτισμός.

2. 
   

   
   
   
   Χρησιμοποιήστε το τρυβλίο Petri. Βάλτε τα βακτήρια στο κουτί και παρατηρήστε τα με μικροσκόπιο. Μπορείτε επίσης να το βάλετε απευθείας σε μια διαφάνεια. Στη συνέχεια μετρήστε τον αριθμό των βακτηριακών κυττάρων που υπάρχουν.

3. 
   

   
   Βεβαιωθείτε ότι έχετε τη σωστή συγκέντρωση. Εάν υπάρχουν πάρα πολλά βακτήρια, θα επικαλύπτονται και δεν θα μπορείτε να τα μετρήσετε σωστά. Σε αυτή την περίπτωση, αραιώστε την καλλιέργεια αναμειγνύοντάς την με λίγο ζωμό. Εάν υπάρχουν πολύ λίγα, το αποτέλεσμα δεν θα είναι σημαντικό. Στη συνέχεια, πρέπει να φιλτράρετε το ζωμό για να αυξήσετε τη συγκέντρωση.

4. 
   

   
   Μετρούν τα βακτήρια. Το τελευταίο βήμα είναι απλά να μετρήσουμε. Κοιτάξτε τους θαλάμους μετρήσεων κάτω από το μικροσκόπιο και σημειώστε τον αριθμό των κυττάρων που βλέπετε. Συγκρίνετε το αποτέλεσμα με άλλες παρόμοιες εμπειρίες.

Μέθοδος 2 Μέτρηση της βιομάζας

1. 
   

   
   
   
   Ελέγξτε ότι έχετε τα απαραίτητα μέσα. Αυτή η μέθοδος είναι αργή στην εφαρμογή και περιλαμβάνει τη χρήση δαπανηρού εξοπλισμού. Εάν δεν το πλύνετε, χρησιμοποιήστε μια άλλη τεχνική. Από την άλλη πλευρά, εάν το εργαστήριο στο οποίο βρίσκεστε έχει τα κατάλληλα εργαλεία, η μέτρηση της βιομάζας και της ξηρής μάζας είναι ιδανική επειδή δίνει ακριβή αποτελέσματα. Χρειάζεστε:
   • έναν υδραυλικό φούρνο με συμπιεσμένο αέρα,
   • μια αλουμινένια ζυγαριά,
   • αρκετές φιάλες Erlenmeyer,
   • μια φυγόκεντρο ή ένα εργαστηριακό σύστημα φιλτραρίσματος.

2. 
   

   
   Ελέγξτε ότι η καλλιέργεια βρίσκεται σε φιάλη Erlenmeyer. Αν αυτό δεν συμβαίνει, ρίξτε το μέσα. Σε αυτό το στάδιο του πειράματος, τα βακτηρίδια εξακολουθούν να βρίσκονται στον ζωμό καλλιέργειας. Θα χωριστούν αργότερα.

3. 
   

   
   Στεγνώστε τη ζυγαριά. Για αυτό, τοποθετήστε το στο φούρνο. Μπορείτε επίσης να χρησιμοποιήσετε φίλτρο μεμβράνης οξικής κυτταρίνης με διάμετρο 47 mm με πόρους 0,45 μm. Όποιο εργαλείο χρησιμοποιείται, μετρήστε με ακρίβεια τη μάζα του, έτσι ώστε να μπορεί να αφαιρεθεί από τα αποτελέσματα που παίρνετε όταν τοποθετείται η καλλιέργεια πάνω σε αυτό.

4. 
   

   
   Mix. Ανακινήστε το lerlenmeyer έτσι ώστε η καλλιέργεια να είναι ομοιογενής. Πράγματι, λόγω της βαρύτητας, τα κύτταρα φυσικά τείνουν να πέφτουν στον πυθμένα του δοχείου. Έτσι πρέπει να ανακινείτε λίγο για το οποίο διανέμονται με ομοιόμορφο τρόπο και ότι το δείγμα σας είναι πιο αντιπροσωπευτικό.

5. 
   

   
   Φυγόκεντρος. Χρησιμοποιώντας τη φυγόκεντρο, διαχωρίστε τα βακτήρια από τον ζωμό καλλιέργειας. Αυτή η συσκευή χρησιμοποιείται για να γυρίσει το δοχείο και ένα αντίβαρο σε πολύ υψηλή ταχύτητα. Ο ρέμας ρέει, ο οποίος διατηρεί μόνο τη ζωντανή ύλη. Για περισσότερες πληροφορίες, θα βρείτε πληροφορίες σχετικά με τον τρόπο χρήσης μιας φυγοκέντρου στο διαδίκτυο.

6. 
   

   
   Πάρτε τη ζύμη. Βάλτε το στη ζυγαριά. Μπορείτε να ρίξετε το ζωμό καλλιέργειας, δεν θα το χρειαστείτε άλλο, αλλά κρατήστε lerlenmeyer στο χέρι.

7. 
   

   
   Ξεπλύνετε τη φυγόκεντρο. Χύστε το νερό ξεβγάλματος στο δοχείο ζύγισης εκτός από τα βακτηριακά κύτταρα. Το αποτέλεσμα που λαμβάνετε για τα πάντα σας δίνει βιομάζα.

8. 
   

   
   Βρείτε την ξηρή μάζα. Για να γνωρίζετε την ξηρή βιομάζα του δείγματός σας, τοποθετήστε τη ζυγαριά στο φούρνο που έχει ρυθμιστεί στους 100 ° C για μια περίοδο 6 έως 24 ωρών, σύμφωνα με τις οδηγίες που παρέχονται με τη συσκευή σας. Προσέξτε να μην υπερβείτε αυτή τη θερμοκρασία για να αποφύγετε την καύση βακτηριδίων. Στη συνέχεια, ζυγίστε τα πάντα, στη συνέχεια αφαιρέστε τη μάζα του δίσκου.

Μέθοδος 3 Προχωρήστε με στροβιλομετρία

1. 
   

   
   Προετοιμάστε τον εξοπλισμό σας. Θα χρειαστείτε μια πηγή φωτός και ένα φασματοφωτόμετρο, μια συσκευή που βρίσκεται στα περισσότερα εργαστήρια επιστήμης. Ανατρέξτε στο εγχειρίδιο χρήσης που παρέχεται καθώς κάθε μοντέλο έχει τη δική του λειτουργία. Αυτή η μέθοδος είναι μία από τις πιο συχνά χρησιμοποιούμενες για τη μέτρηση της βακτηριακής ανάπτυξης, καθώς απαιτεί μόνο φθηνά και εύχρηστα εργαλεία.

2. 
   

   
   Φέρτε φως στην κουλτούρα. Η θολερότητα χρησιμοποιείται για να εκτιμηθεί η περιεκτικότητα ενός υγρού σε σωματίδια, αν και είναι περισσότερο ή λιγότερο θολό. Το αποτέλεσμα που θα λάβετε από αυτή τη μέτρηση θα δοθεί στο NTU (ή Νεφελομετρικές μονάδες θολότητας). Μπορεί να χρειαστεί να πραγματοποιηθεί βαθμονόμηση της συσκευής προκειμένου να μετρηθεί με ακρίβεια η θολερότητα του δείγματος.

3. 
   

   
   Σημειώστε. Θολότητα είναι η ποσότητα των βακτηρίων στο δείγμα. Το φασματοφωτόμετρο θα σας επιτρέψει επίσης να γνωρίζετε τη μετάδοση του διαλύματος (% T), η τιμή του οποίου είναι αντιστρόφως ανάλογη με εκείνη της θολότητας. Στη συνέχεια συγκρίνετε τα αποτελέσματα που λαμβάνονται σε διαφορετικά δείγματα για να μετρήσετε την ανάπτυξη των βακτηρίων.